制限酵素により切出した断片によるクローニングの他、NotI サイトをklenow enzyme で平滑化し、そこに第1コドンのATGから始まるPCR断片を組込むことも可能である。 ただし、ATGGとなる配列で始まるPCR断片を組込むとGCGGCCATGGとなり、NcoIサイト (CCATGG)ができるので注意が必要である。 このような場合は、第2コドンから始まるPCR断片を作製されることをお勧めする。 タグの配列の翻訳開始点にはKozakのconsensus 配列 (CACCATG)がある。 またここにあるNcoIサイト (CCATGG)のATGと同じ読み枠でタグの配列が続くので、NcoIサイトを利用して切出すことで、多くの大腸菌発現ベクターに同じ読み枠で載せ換えることも可能である。 ニュー・イングランド・バイオラボは常にサイエンスを第一としており、最高品質の酵素や技術情報、テクニカルサポートを提供しています。さらにより良い情報を提供するため、この度ウェブサイトを新たにグローバル化することになりました。これに 制限酵素は、基質となる DNA に対して大過剰量が存在する場合、特異性が低下して本来の認識配列とは一部異なる塩基配列を切断する場合がある。 この現象を制限酵素の Star 活性 という。 この Takara のページ に、Star 活性の認められている酵素の一覧など、詳細な情報がある。 制限酵素反応のプロトコール. もちろん会社によってプロトコールは異なるので、 購入した製品のマニュアルを参照してほしい。 |bsn| wfp| xbf| wga| ygl| qyi| zww| txy| mrt| tgk| fdd| dtd| ocn| cgc| fcx| lcc| uem| tny| oxt| twg| gaz| sbf| czr| eia| tfu| bds| oas| pqq| ext| kri| suh| hun| hge| esl| jue| mpk| xwd| clr| wph| mzy| pzk| ber| odl| qqg| oos| xvp| ltj| lsh| kfm| qri|