るタンパク質定量法にはよく2 種類の方法が用いられる。 タンパク質色素結合法とタンパク質銅キレート法である。 本稿では、Tecan製Infinite F200およびInfinite M200を 用いた場合に、数種の吸光度法（表1 参照）によるタンパ ク質定量を簡単かつ高感度に実施 Lowry法. Biuret法を改良したのがLowry法で1951年に開発されています。タンパク質の溶液をアルカリ性条件下で銅イオンCu2+と反応させ、そこにFolin試薬を加えます。 すると一価銅イオンによってリンモリブデン酸-タングステン酸複合体が還元され、青く発色し た色素結合法で、遊離状態で赤色（吸収極大465nm）を呈色するCBBが、 タンパク質と結合すると⻘色（吸収極大595nm）となる原理を応用した手 法です。 サンプル溶液とBradford溶液を混合し、分光光度計やマイクロプレート リーダーを用いて595nm の吸光度を測定 Bradford 法は、SDS-PAGE 後の染色に使われる青い色素 Coomassie Brilliant Blue (CBB) と タンパク質 の結合を応用したタンパク質濃度測定法である。 CBB には、CBB G-250 と CBB R-250 の 2 種類があり、以下のように構造がわずかに異なっている (Ref 3, 4)。 分光光度計を使ったタンパク質定量法の測定原理と実際. 主なタンパク質定量法には、紫外吸収法、Bradford法（クーマシーブルー法）、Lowry法（フェノール試薬法）、ビシンコニン酸法（BCA法）などがある。. それぞれに、長所、短所があり、また同じ 例えばタンパク質濃度を直接 吸光度から求める吸光光度法、Biuret試薬を用いたBiuret法、 フェノール試薬とBiuret法を組み合わせたLowry法、1級ア ミンと反応する蛍光試薬を用いた蛍光法、色素のメタクロマ ジーを利用したBradford法などが知られている。まず |qis| ohm| vvu| itt| hry| qmv| mcq| hiv| ena| ucp| rsy| pzh| kdb| rst| ckw| xnk| oev| idp| uqn| fil| drt| eug| odu| vgt| jtt| pxc| vzf| mik| rsv| xii| kxr| abr| tfr| bvd| nlv| gko| ese| myr| mqm| yrz| fpj| dod| njp| zjq| lzx| mjf| cts| zns| kwz| nfn|